Laut einer Legende gab es bereits im siebten Jahrhundert in Regensburg einen Chor junger Männer. Urkundlich belegt ist der Regensburger Chor aber erst ab dem Jahr 975 mit der Gründung einer Domschule durch Bischof Wolfgang von Regensburg. Damit sind die Regensburger Domspatzen einer der ältesten Knabenchöre der Welt, auf jeden Fall gehören sie zu den renommiertesten und berühmtesten Chören. Erste Konzertreisen unternahm der Chor Anfang des 20. Jahrhunderts unter seinem damaligen Leiter Franz Xaver Engelhardt. Ab 1964 wurden die Regensburger Domspatzen von dem Domkapellmeister Georg Ratzinger, dem Bruder des heutigen Papstes Benedikt XVI., geleitet. Die jährlich unternommenen Auslandstourneen führten den Chor u.a. nach Japan, Kuwait, Südafrika, Philippinen, Südamerika und in nahezu alle europäischen Länder.  

Der Chor besteht aus Knaben und jungen Männern, die an einem eigenen sprachlichen und humanistischen Musikgymnasium unterrichtet werden. Insgesamt besuchen etwa 500 Domspatzen Schule, Internat und Chor. Die Tages- und Internatsgrundschule der Regensburger Domspatzen ist in einem Klostergebäude untergebracht. Dort werden Jungen der 1. bis 4. Klasse auf das Gymnasium der Domspatzen vorbereitet.

Im Jahr 2005 veröffentlichten die Regensburger Domspatzen ein Album mit einem „Konzert für Papst Benedikt XVI.“. Die Platte erreichte den 5. Platz der Klassik Charts und den 86. Platz der Album Charts . Das Konzert wurde in der Sixtinischen Kapelle im Beisein des Papstes unter der Leitung von Domkapellmeister Roland Büchner aufgenommen. Büchner war es auch, der mit Händels „Messias“, Haydns „Schöpfung“ oder auch Bachs „Matthäus- und Johannespassion“ das Repertoire des Chores weiter ausbaute.